Skip to main content
فهرست مقالات

Biolistic co-transformation of rice using gold nanoparticles مقاله

نویسنده:

چکیده:

ABSTRACT- In order to produce transgenic rice lines lacking selectable marker gene, biolistic co-transformation technique using gold nanoparticles was adopted. In the first step, the efficiency of different sizes of gold particles was evaluated. The results showed that the efficiency of the nanoparticles in the transformation was comparable to that of the micro particles. Subsequently, two separate plasmids including p UBC harboring cry IA (c) gene and pTRA132 carrying hph gene as selectable marker gene were mixed and coated with gold nanoparticles. Embryo genic calli originated from mature rice seeds were targeted with plasmid-coated nan projectiles. Putative transgenic cells were selected from selection media after three subcultures in MS medium were supplemented with 50 mg hygromycine B l-1 in three weeks' intervals. The selected calli were then grown into putative transgenic plantlets. Molecular analysis performed on the regenerated lines showed that at least one copy of both genes was inserted into the genome of some transgenic lines. RT-PCR analysis also confirmed successful transcription of the cry IA (c) gene. Accordingly, it could be concluded that the biolistic co-transformation method using gold nanoparicles could be a successful method for gene delivery into rice varieties. Nevertheless, expression of cry IA (c) gene and loci of both genes should still be investigated in future studies.

به منظور تولید لاین های برنج تراریخته مقاوم به آفات که فاقد ژن نشانگر انتخابی باشد، تکنیک ریزپرتابی با استفاده از نانوذرات طلا مورد استفاده قرار گرفت. در نخستین گام، کارایی نانوذرات طلا با اندازه های مختلف مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج نشان داد که نانوذرات طلا می توانند به اندازه میکروذرات در انتقال ژن کارایی داشته باشند. در گام بعد، دو پلاسمید مجرا مورد استفاده قرار گرفتند. پلاسمید puBC حامل ژن cry۱A(c) و فاقد ژن مارکر انتخابی به همراه پلاسمید pTRA۱۳۲ حاوی ژن مقاومت به هیگرومایسین به عنوان نشانگر انتخابی مخلوط شده و سپس با نانوذرات طلا پوشش داده شدند. این مخلوط پلاسمیدها به کالوس های جنین زایی که از بذور رسیده منشا گرفته و دارای توان تقسیم سلولی و باززایی بالایی بودند، به روش ریزپرتابه وارد شدند. سلول های تراریخته احتمالی از بافت های بمباران شده پس از ۳ دوره گزینش در محیط کالوس زایی N۶ حاوی ۵۰ میلی گرم در لیتر هیگرومایسین B مورد گزینش قرار گرفتند. نهایتا کالوس های مقاوم به هیگرومایسین در محیط باززایی MS حاوی ۵۰ میلی گرم در لیتر هیگرومایسین B باززا شدند. در نهایت گیاهان تراریخته احتمالی حاصل با آنالیزهای مولکولی مورد بررسی قرار گرفتند. این آنالیزها نشان داد که حداقل یک نسخه از ژن مورد نظر به گیاهان تراریخته وارد شده است. آنالیز RT-PCR نیز تایید کرد که ژن cryIA(c) در گیاهان تراریخته قابلیت رونویسی و بیان ژن را دارد. لذا می توان استنباط کرد که استفاده از روش ریزپرتابه و نانوذرات طلا می تواند یه روش کارا و موثر در انتقال ژن و تولید گیاهان تراریخته به ویژه در گیاه برنج مورد استفاده قرار گیرد.

کلیدواژه ها:

نانوذرات طلا ، برنج ، cryIA(c) ، ریزپرتابی ، تراریزش توام

cryIA(c) ، Rice ، Gold Nanoparticles ، Biolistic ، Co-transformation


برای مشاهده محتوای مقاله لازم است ورود پایگاه شوید. در صورتی که عضو نیستید از قسمت عضویت اقدام فرمایید.

لمشاهدة محتوی المقال یلزم الدخول إلی دخول الموقع.
إن كنت لا تقدر علی شراء الاشتراك عبرPayPal أو بطاقة VISA، الرجاء ارسال رقم هاتفك المحمول إلی مدير الموقع عبر credit@noormags.ir.

You should become a Sign in to be able to see articles.
If you fail to purchase subscription via PayPal or VISA Card, please send your mobile number to the Website Administrator via credit@noormags.ir.